昆蟲桿狀病毒技術(shù)服務(wù)采用目宿銀紋夜蛾桿狀病毒(AcNPV)作為表達(dá)載體。昆蟲桿狀病毒表達(dá)載體是一種輔助性依賴,它僅有質(zhì)粒載體不能表達(dá)外源基因,還需野生型桿狀病毒輔助,形成整合有外源基因的重組型桿狀病毒才能完成外源基因的表達(dá)的真核DNA表達(dá)載體。 由于該系統(tǒng)所需要的周期遠(yuǎn)比動物或植物系統(tǒng)短,可以利用昆蟲個體或其培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模的表達(dá)生產(chǎn),生產(chǎn)的重組蛋白產(chǎn)量高,蛋白翻譯后加工比細(xì)菌、酵母生產(chǎn)系統(tǒng)完善,而且由于昆蟲桿狀病毒具有限制性的宿主范圍,只對特定種屬的昆蟲及其細(xì)胞進(jìn)行感染,對人畜等脊椎動物沒有感染能力,因此具有比在哺乳動物及其培養(yǎng)細(xì)胞生產(chǎn)系統(tǒng)更為安全等優(yōu)點而成為目前*的真核表達(dá)系統(tǒng)之一。
昆蟲桿狀病毒技術(shù)服務(wù)的技術(shù)特點:
1.重組蛋白表達(dá)水平高(最高可達(dá)細(xì)胞總蛋白的50%),大多數(shù)為有生物功能的可溶性蛋白;
2.真核表達(dá)系統(tǒng),重組蛋白生物學(xué)活性高,能同時表達(dá)多個外源基因;
3.可進(jìn)行翻譯后修飾:磷酸化修飾,形成正確折疊的二硫鍵,進(jìn)行N-和O-型糖基化修飾
4.表達(dá)人源化蛋白,昆蟲細(xì)胞中糖基化途徑克服人源糖蛋白的問題。
5.大多數(shù)昆蟲細(xì)胞系在不加血清培養(yǎng)基中快速生長,得到高滴度病毒和高產(chǎn)量重組蛋白;
6.相對于其他真核表達(dá)系統(tǒng)成本較低,硬件設(shè)施成本低接近于原核表達(dá),無需CO2培養(yǎng)箱,無需血清培養(yǎng)基;
7.規(guī)?;囵B(yǎng)簡單經(jīng)濟(jì),適合自動化生產(chǎn),昆蟲細(xì)胞比哺乳動物細(xì)胞操作簡單;
8.商業(yè)化的BEVS系統(tǒng)讓病毒重組及蛋白表達(dá)變得更簡單。